生物分子分析仪操作说明
发布时间:2025-06-06 16:13
1、 打开电脑,打开 Octet 仪器电源,取出仪器内部的传感器托盘和样品板,关闭舱门,打开 Octet 操作软件Octet BLI Discovery,仪器进入初始化过程,约1 min仪器初始化完成后显示 Ready 状态; 2、 传感器预湿预湿板放置蓝色的底盘中,在传感器放置的孔中加入200μL 分析缓冲液。传感器需预湿>10 min; 3、 在操作软件Experiment Wizard中选择 New Kinetics Experiment-Basic Kinetics点击 ,进入 protocol设置界面。方法编辑依次分为5个步骤 Plate Definiton、Assay Definiton、 Sensor Assignment、Review Experiment、Run2 Experimen; 4、 在plate definition 中根据样品的实际位置设置样品板,根据多浓度完整动力学分析的需要分析步骤需要baseline1、loading、baseline2、association、dissociation 五个步骤。 因此,需要设置 4 列样品,分别为 bufer1 用于baseline1 步骤、load 用于 loading 步骤、bufer2 用于 baseline2 和 dissociation 步骤、sample 用于association 步骤。如下图:选中第一列样品右键将第 1 列样品设置成 bufer,第二列样品设置成load,第三列样品设置成bufer,第四列样品设置成 sample,相应的样品信息可在软件的右方进行输入,例如 sample ID、样品浓度Conc 等。在动力学分析时必须输入样品的摩尔浓度; 5、 在assay definition 中进行步骤设定:1)点击窗口中的 add 添加需要进行的分析步骤,同时设置分析步骤的时间。如下图,添加 baseline、loading、baseline2、association和dissociation步骤,点击OK确定所选步骤。如需要修改某一参数,可双击进行修改。2)在 step data list 中单击 baseline,将箭头移至 baseline,代表对这个步骤在样品板上的检测位置进行设置,然后双击样品板的第一列样品,实验开始时将在第一列样品(bufer)中进行 baseline 的检测。 在 assay steps list 中将显示添加的第一个步骤在第一列的样品中进行 baseline 的分析; 注意事项: 1. 使⽤时样品板每孔装液量不应超过推荐值(96 孔板 200 uL),避免实验过程中的振荡将过量液体洒出,污染设备内部结构。 2. 传感器需预湿。 3. 实验过程中,预湿板需要放在最左侧的板位,再将绿⾊的传感器托盘放置妥当,整个实验中,传感器初始状态必须在预湿缓冲液中。 4. 使用前后用无尘纸或者75%的酒精纸进行擦试。 5. 实验完成后及时拿⾛样品板和预湿板及传感器托盘。 |